- 予算区分
- BA 環境-推進費（委託費） 5-1593
- 研究課題コード
- 1921BA017
- 開始/終了年度
- 2019~2021年
- キーワード(日本語)
- 分子鋳型,甲状腺ホルモン受容体,精密質量,データベース
- キーワード(英語)
- molecularly imprinted polymers,thyroid hormone receptor,accurate mass,databese
研究概要
本研究では， 甲状腺ホルモン受容体（TR）結合活性物質のスクリーニング手法を確立することを目的として，TR模倣分離基材によるクロマトグラフィー的手法と機器分析を用いたTR結合活性評価法を開発し，さらに，同法及び酵母アッセイと精密質量分析計との組み合わせによりTR結合活性化合物のデータベースを作成する。
研究の性格
- 主たるもの：基礎科学研究
- 従たるもの：応用科学研究
全体計画
1年目（2019年度）には、in vitro 試験による約600 種類の化学物質のTR 結合活性（アゴニスト及びアンタゴニスト）評価を行う。他の受容体結合活性試験に供した約500 物質について，in vitro 試験である酵母ツーハイブリッド法によりTR 結合活性を同一条件で測定して定量化する。その他公開されているデータベースや文献調査等も参照し，必要に応じて測定対象に加える。
２年目（2020年度）には、TR結合活性物質の精密質量データベースを作成する。また、
環境水試料のMIP 吸着画分からのTR 結合活性物質の探索：TR 結合活性が報告されている下水処理場排水を用い，TR結合活性物質を選択的に濃縮する分子鋳型（MIP） への吸着画分を，TofMS等を用いて測定し，精密質量データベースを用いてTR 結合活性物質の検出及び定量を行う。
３年目（2021年度）には、下水処理場排水等から検出されたMIP 溶出画分中のデータベース未収載のピークについて，サブテーマ1 で開発したMIP による活性測定を実施し，活性の強い順に構造推定の優先順位付けを行う。また，血液・尿試料を用いた甲状腺関連疾患のバイオマーカーを探索も試行する。
今年度の研究概要
昨年度のスクリーニング試験の結果，アゴニスト陽性を示した物質について，液体クロマトグラフィー（LC）／四重極(Q)／飛行時間型質量分析計（TofMS）を用い，プレカーサーイオン及びプロダクトイオンの精密質量を測定し，定性解析用データベースを作成する。またTR結合活性が報告されている下水処理場排水を用い，サブテーマ1で前年度に作製したMIPへの吸着画分を，LC/Q/TofMS（必要に応じてGC/Q/TofMSも）測定し，精密質量データベースを用いてTR結合活性物質の検出及び定量を行う。その結果から各検出物質の寄与率を算出する。
外部との連携
京都大学、県立広島大学
