科学技術振興調整費による研究

６．国際共同研究（多国間型）

（１）アジア地域の微生物研究ネットワークに関する研究

　1) 有毒微細藻類とそれらの増殖制御技術の開発

〔研究担当〕

〔内　容〕
　本年度は（１）アジア地域における有毒微細藻類の異常発生の状況調査および有毒微細藻類の採集とそれらの分離培養（２）微細藻類の生産する有毒物質の化学的性質の解明および（３）有毒微細藻類の増殖を制御する微生物の探索を目標とした。これらの研究目標に対して以下の成果を得た。

（１）本年度は中国の内蒙古のダライ湖およびタイの南東部の飲料水源の調査を行った。ダライ湖の試料の主要藻類は藍藻のＡｎａｂａｅｎａ ｆｌｏｓ-ａｑｕａｅで，タイの２カ所の飲料水源の主要微細藻類はともにＭｉｃｒｏｃｙｓｔｉｓ ａｅｒｕｇｉｎｏｓａであった。これらの藍藻類を分離し，大量培養した。

（２）これらの藍藻の生産する主要毒素はミクロシスチンＬＲが１００％のものとミクロシスチンＲＲ，ＬＲおよびＹＲを含むものであることを明かにした。また新規毒素ＬＢｕを同定した。

（３）有毒微細藻類の増殖を阻害する成分を酵母から単離し，構造決定した。また，有毒微細藻類を捕食する原生動物を武漢の池から採取した。
〔発　表〕Ｄ-５，９

　2) 微細藻類の系統分類学的研究及び種の多様性の解析

〔研究担当〕

〔内　容〕
　アジア地域の微細藻類の多様性を解明し，それらの形態・生理生化学的特性に基づく新たな分類・同定システムを構築し，分子系統学的解析を行う。
　本年度は，富栄養湖沼で水の華を形成するユレモ，Ｏ．ａｇａｒｄｉｉ ｃｏｍｐｌｅｘの種の実体を明らかにするための研究を実施した。タイ，中国，日本等で分離培養された無菌株１２株はＧＣ含量，色素組成，脂肪酸組成及び形態の特徴により５つのグループに区分することができた。グループ１はＧＣ含量４２．７〜４７．２％でフィコシアニンのみを有し，１６：１（ｔｒａｎｓ)，１６：２，１６：３，１８：４の脂肪酸をもたないことで特徴づけられ，グループ２はＧＣ含量，脂肪酸組成はグループ１に類似するが，フィコエリスリンを有することで特徴づけられる。グループ３はＧＣ含量と色素組成でグループ１と類似するが，１８：４の脂肪酸を有することで異なる。グループ４はＧＣ含量，色素組成，脂肪酸組成でループ２に類似するが，細胞サイズが大きく，さらに補色適応を行うことで異なる。グループ５はＧＣ含量が５３．３％と他のグループより高く，糸状体の直径が最も大きく，さらに糸状体のまわりに固い鞘を発達させることで特徴づけられる。
〔発　表〕Ｈ-３６，３７，４０，ｈ-３１〜３４，３９〜４３

　3) 微細藻類の系統保存体制の整備と保存ネットワークの構築

〔研究担当〕

〔内　容〕
　本研究では，アジア地域より分離培養された微細藻類の適切な保存法の開発，微細藻類培養株のデータベースの構築とその管理法の開発，微細藻類特定データ解析システムの構築を行うことを目的とする。
　シアノバクテリアの培養株２７種１４４株について，凍結保存条件を検討した結果，ほとんどのシアノバクテリアが凍結融解後生存することがわかった。細胞分裂能力をもとにした生存率とＦＤＡ法による生存率との間にｒ＝０．９６５という高い相関が確認された。１６種２６株のシアノバクテリアの凍結融解後の生存率をＦＤＡ法により測定した結果，９種１６株について６０％以上の生存率が，４種４株について３０〜４０％の生存率が得られた。シアノバクテリアＡｎａｂａｅｎａ（アナベナ）属をモデルとして，微細藻類特定データ解析システムの設計を行った。アナベナ属に所属する種の分類に重要な２６項目の形態形質を選び，試料データファイルと標準データファイルの２ボックスを設定した。試料データと標準データファイルに登録されているアナベナの標準種の形質との一致度から，どの種に対応するかサーチされた。細胞糸形状，形態及び休眠胞子の形態に重きをおいて，計算した結果，システムの同定結果と専門家の同定結果はほとんど一致した。
〔発　表〕Ｈ-３６，３７，４０，ｈ-３６，４３〜４７