２．１１　内分泌撹乱化学物質総合対策研究

２．環境中動態解明に関する研究

〔担当者〕

地域環境研究グループ	：	森田昌敏・矢木修身・中嶋信美・高木博夫・田邊　潔
化学環境部	：	彼谷邦光・白石寛明・佐野友春
生物圏環境部	：	畠山成久

〔期　間〕
平成１１年〜１３年（１９９９〜２００１年度）

〔目　的〕
　ホルモン作用を示す化学物質の水圏，土壌圏，および大気圏における存在量，存在形態，蓄積分解速度，生物における濃縮速度あるいは分解速度といった動態に関する知見はほとんどない。多くの環境ホルモンは閉鎖性水域に濃縮され，最終的に海洋中に蓄積していくと考えられるが，飲料水源となる陸水における環境ホルモンや海における環境ホルモンの動態を明らかにする。また，土壌や大気中における環境ホルモンの存在量，存在形態及び動態の解明によって，人や生物がどの程度環境ホルモンが体内に蓄積するかを明らかにする。

〔内　容〕
１．霞ヶ浦およびその流域，及び東京湾における環境ホルモンの存在量，存在形態，生物蓄積，分解速度等の動態に関する研究を行う。具体的には，これらの閉鎖水域の化学物質の残留状態を水中でのいくつかの環境ホルモン（ビスフェノールA等）の化学分析を通して明らかとする。
２．土壌圏及び大気圏における環境ホルモンの動態に関する研究として，土壌及び植物圏における環境ホルモンの分布状況を明らかとすると共に，生物による分解，及び光分解等物理化学的分解等の知見をうる。

〔成　果〕

　霞ヶ浦をモデルフィールドとして，湖水に含まれる女性ホルモン様物質の溶存量及び生物における蓄積に関する調査を行なった。魚のメス化に強く貢献するものとして人畜由来の１７β-エストラジオールの濃度を地点及び季節を変えて測定した。その結果，従来いわれていた１０ppt前後であるという報告は否定され，真の値は０．５ppt付近にありそうであることが明らかとなった。この結果は，湖水を抽出濃縮し，イーストTwo-hybrid試験の結果によく一致している。湖水中でのエストラジオールの残留性を検討するため，夏場の湖水に１００pptのエストラジオールを添加し，その消長を追跡した。その結果，エストラジオールの半減期は約８時間であり，湖水に蓄積されるとは考えにくいことが明らかとなった。また変化した物としてエストロンの生成が認められ，エストリオールの生成は認められなかった。
　環境エストロゲンとして他の有力な候補は，ビスフェノールA及びノニルフェノール類である。ビスフェノールAの湖内での分解を，湖水及び底質をいれた水槽中で観察した。水中の微生物がもっとも少ないと考えられる対照水（水道水を活性炭ろ過したもの）に加えた場合７日後においても３０％が残留し，その分解はゆっくりしていることが明らかとなった。これに対し湖水に添加した場合は，２日間程度の馴致後急速に減少しはじめ，４日後にはほとんど検出されなくなった。底質が存在する時は添加後すぐに減少しはじめ，３日後には検出できなくなった。ビスフェノールAの水中濃度の減少に微生物による分解が関与している可能性が高い。このため，霞ヶ浦において大きなバイオマスを占めるアオコの分解に果たす役割について検討することにした。アオコ株（オーストラリア種）をビスフェノールA共存下で培養し，細胞内にとりこまれたビスフェノールAのみで代謝産物についての分析を開始した。湖沼環境を想定し，藍藻Osallatoria agardによるビスフェノールAの代謝物（２-p-hydroxyphenyl-２-propanol）の構造を確認した。
　分取ガスクロマトグラフ（PCGC）を用いて環境試料から化学物質を単離精製し，年代測定を行うために，１０μgCまでの極微量の試料処理を可能にする新たな試料前処理，グラファイト化ラインを作成し，条件を確立した。この前処理ラインとPCGCを用いて大気粉じん中の脂肪酸を測定したところ，陸上植物起源と考えられる長鎖脂肪酸（C２４-C３２）で現在より最大数千年古い年代値が得られた。化石燃料燃焼過程からの寄与の確認など今後の研究が必要な段階ではあるが，昨年度の結果とあわせ，自然起源と思われる化合物の中にもかなり古い年代を示すものが現在の環境中を動いていることが明らかとなり，１４C年代測定による化石燃料起源の同定のためにこうした自然起源物質の動きをより詳細におさえる必要のあることが明らかとなった。
　また一方で東京湾に生息する魚の試料採取を開始しており，それに残留する化学物質の分析が行なわれる予定である。土壌圏及び大気圏における環境ホルモンの動態に関しては文献調査を行なった。
　ビスフェノールAの土壌から植物への吸収及び，植物による代謝についての予備的な検討を開始した。放射性ラベル化されたビスフェノールAはタバコ培養細胞に移行し，３つの代謝産物に代謝されることを明らかにした。そのうち最も疎水性の高い代謝産物を精製し構造決定を行った結果，ビスフェノールA-β-１，４-グルコースと推定された。またこの代謝産物のエストロゲン活性を調べたところ，ビスフェノールAに比べて著しく，エストロゲン活性が減少していることが明らかとなった。以上のことから，植物細胞にビスフェノールAを吸収させて，エストロゲン活性を減少させることが可能であることが示された。

〔発　表〕b-２１１，b-２５３，b-２５７，b-２６１